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培养基与培养时间对检测水体中细菌总数的影响!

小杨 / 2019-11-06

正文


我们采用4种不同培养基对水体中细菌进行培养,比较不同培养基与不同培养时间对水体中细菌总数检测结果的影响,现报告如下。

一、材料与方法

⒈培养基:营养琼脂、肉浸汤琼脂、蛋白胨葡萄糖琼脂、857培养基。

⒉样品来源:1998年1O月随机采取本市便河居民点生活用自来水,便河河水及本院池塘塘水各9份。?

⒊方法:自来水采样:先将采样点自来水龙头完全开放,放水5分钟后调水流量,常规无菌采集水样500ml,并加入无菌的3%硫代硫酸钠溶液0.5ml以除去残余氯;河水与塘水采样:先将密封状态的无菌采样瓶完全浸入水中后,掀开瓶塞,取样约500ml。按照“GB4789.2—94微生物学部分”进行细菌总数检测。每次以无菌方法分别吸取lml充分混匀的水样于灭菌空平皿中,每份水样各加8个,每2个为1组,随即分别加入15ml灭菌并置45℃预温的营养琼脂、肉浸汤琼脂、蛋白胨葡萄糖琼脂、857琼脂并充分混匀,凝固后,置37~C培养24h、48h、72h、96h并分别记录各培养基中菌落形成单位(CFU)均数。采用秩和检验进行统计学分析。

二、结果

⒈4种方法培养后CFU均数结果:24h内4种培养基的CFU均数最低,随培养时间延长而增高

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⒉不同时间培养后4种培养基的CFU均数的结果显示:培养48h与72h、72h与96h组间CFU均数差异无显着性;培养24h与48h,24h与72h、24h与96h、48h与96h各组间、CFU均数的差异有高度显着性(P<0.01)。

2.3 4种培养基的CFU均数间两两比较:除营养琼脂培养基与蛋白胨葡萄糖琼脂培养基之间CY'U均数的差异无显着性外,肉浸汤琼脂培养基与营养琼脂培养基、肉浸汤琼脂培养基与蛋白胨葡萄糖琼脂培养基、肉浸汤琼脂培养基与857培养基、营养琼脂培养基与857培养基、蛋白胨葡萄糖琼脂培养基与857培养基、CFU均数的差异均有高度显着性(P<0.01)。

三、讨论

⒈本组4种培养基接种标本后,l~4天内CFU均数均随培养时间延长而增加,培养24h与48h、72h、96h之间差异显着(P<0.01);但培养48h与72h、72h与97h组问差异无显着性。本结果显示:虽然培养时间对CF’U数的变化有直接影响,但按“GB4789.2—94微生物部分”方法培养48h报告结果,能准确地检测水体样本的细菌总数。

⒉按“GB4789.2-_94微生物部分”的方法,检测细菌总数采用营养琼脂培养基。本实验采用包括营养琼脂培养基在内的4种不同培养基进行检测,结果表明,不同培养基之间CFU均数差异显着,且肉浸汤琼脂培养基>营养琼脂培养基>蛋白胨葡萄糖琼脂培养基>857培养基。值得注意的是肉浸汤琼脂培养基与营养琼脂培养基的CY'U均数差异显着,且培养至24h观察结果时,肉浸汤琼脂培养基表面的菌落较大,易辨认,而营养琼脂培养基上菌落较小,需培养48h后计数。这可能与前者用新鲜牛肉浸液配制,而后者用牛肉膏配制有关。因肉浸汤琼脂培养基营养高于营养琼脂培养基,更有利于水体样本中细菌总数的检测。

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